【一、食品衛(wèi)生檢測行業(yè)背景與需求】

隨著食品安全國家標準體系持續(xù)完善, GB 4789系列標準針對食品中菌落總數(shù)的檢測給出了明確要求, 傳統(tǒng)微生物培養(yǎng)法得出結(jié)果需18至24小時, 這種時間上的滯后性, 在中央廚房、學(xué)校食堂、冷鏈食品加工、餐飲具消毒效果驗證等場景里, 已然成了制約衛(wèi)生管理效率的瓶頸。特別是處于疫情防控常態(tài)化的背景狀況下, 監(jiān)管相關(guān)部門針對餐飲具表面潔凈程度、熟食制品微生物污染進行篩查的頻次顯著提高, 此行業(yè)急切需要一種能夠于10至15分鐘內(nèi)迅速給出結(jié)果、并且操作簡便易行的現(xiàn)場檢測方案。萊恩德科技依據(jù)這一需求, 推出了基于ATP生物熒光法的菌落總數(shù)快速檢測方案, 助力用戶達成從“事后追溯”向“即時監(jiān)控”的轉(zhuǎn)變。

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【二、實驗所需儀器與試劑】

核心儀器：萊恩德LD-ATP系列菌落總數(shù)快速檢測儀

該方案所推薦使用的儀器, 為萊恩德LD - ATP型手持式ATP熒光檢測儀, 或者是升級版的LD - ATP +型, 這二者的核心檢測能力是一致的。該儀器是基于“熒光素酶—熒光素體系”的原理制造的。它是通過檢測樣品當中三磷酸腺苷, 也就是ATP的含量, 進而間接反映出微生物數(shù)量以及生物殘留水平的。采用3.5英寸高精度觸摸屏的LD-ATP系列, 告別了傳統(tǒng)按鍵操作, 32位高速數(shù)據(jù)處理芯片確保了檢測響應(yīng)速度, 其檢測精度達到1×10?1? mol（1fmol）, 檢測范圍是0-999999 RLU, 單次檢測只需15秒, 遠遠快過傳統(tǒng)培養(yǎng)法。該儀器內(nèi)部設(shè)置了自行校準的光源, 開啟電源后30秒會自動進行自我檢測, 它支持RLU以及大腸菌群這兩種模式的檢測結(jié)果輸出, 能夠隨意去設(shè)定有關(guān)合格或者不合格的上限數(shù)值, 進而自動對結(jié)果作出判斷。LD - ATP + 這個型號還配備了安卓智能系統(tǒng), 其呈現(xiàn)4G內(nèi)存的狀態(tài)且能夠存儲10萬條數(shù)據(jù), 能夠支持通過wifi、藍牙、USB等多種形式上傳到在線監(jiān)管平臺, 如此便有利于對于歷史數(shù)據(jù)進行曲線分析以及衛(wèi)生管理計劃的制定。

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配套試劑與耗材

ATP檢測拭子（一體化采集拭子）: 其中含有能夠裂解細胞膜的試劑, 還有穩(wěn)定的液體熒光素酶, 它被用于表面樣本的ATP采集, 同時用于液體樣本之中的ATP反應(yīng)激發(fā)。

沒有細菌的采樣袋, 或者采樣用的管子, 是用來對像水質(zhì)、飲料、乳品這樣的液體樣本, 進行在處理之前的采集工作的。

無菌的手套, 酒精制成的棉片: 要保證采樣的過程當中, 不會有來自外部的ATP出現(xiàn)污染的情況。

留意，全部的拭子以及耗材都是通用類型的, 能夠去匹配萊恩德LD - ATP系列的儀器。

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【三、標準實驗操作方法】

樣品前處理

針對表面樣本, 像餐具、操作臺面這類, 要用無菌拭子于10cm×10cm的標準面積之中做出均勻涂抹, 還要旋轉(zhuǎn)拭子, 以此保證覆蓋住全部采樣區(qū)域。針對液體樣本, 像是水質(zhì)、乳品、飲料那般, 要取1 - 2mL樣品到無菌采樣管內(nèi), 把拭子浸到樣品里, 并且在充分浸潤后取出來, 輕輕甩甩以去除多余液體。對于像熟食、生鮮肉這類的固體食品樣本, 取25g樣品, 將其剪碎, 之后加入225mL無菌生理鹽水, 再進行均質(zhì)處理, 接著取1mL上清液用來進行檢測。

儀器準備與設(shè)置

開機之后, 儀器會自動開展30秒的自檢工作, 等到屏幕呈現(xiàn)出“Ready”狀態(tài)以后, 才進入到設(shè)置菜單之中。用戶能夠依據(jù)行業(yè)標準或者內(nèi)控要求去設(shè)定RLU的上限值以及下限值, 就像餐飲具潔凈度要求小于等于100 RLU才算是合格似的。LD - ATP +型可以借助安卓系統(tǒng)直接錄進樣品編號、檢測人員、檢測地點等信息, 以此方便數(shù)據(jù)溯源。建議在每一次檢測之前, 拿空白拭子（不接觸樣品）做一回空白對照, 以此確保拭子與儀器狀態(tài)是正常的。

實驗操作步驟

1. 把采集完樣品的拭子, 插入用于檢測的儀器艙內(nèi), 要保證拭子底部, 和檢測傳感器全部接觸。

2. 按一下“檢測”這個按鍵, 儀器會自行啟動反應(yīng)計時, 在15秒過后, 屏幕會直接呈現(xiàn)RLU價值指標, 表示出來。

3. 儀器會自動去判斷究竟是合格還是不合格情況, 通過綠燈或者紅燈來予以指示, 并不需要專人進行人工判讀。

4. 要是有進行大腸菌群篩查的需求, 能夠于設(shè)置里切換到“大腸菌群”模式, 接著重復(fù)上述所做的操作。

數(shù)據(jù)采集與處理

LD - ATP系列具備支持miniUSB接口連接PC的特性, 借助隨機配備的數(shù)據(jù)分析軟件來導(dǎo)出歷史數(shù)據(jù)。至于LD - ATP+型號, 它更有著支持wifi即時上傳至在線監(jiān)管平臺的能力, 自動生成諸如趨勢曲線圖、餅狀圖這類圖表, 且能夠以Excel格式點對點分享至手機端, 從而方便進行遠程查閱與匯報?？梢蕴岢鲞@樣的提議, 就是把每天進行檢測所得到的數(shù)據(jù), 依照日期、樣品的類型以及結(jié)果來進行分類并存檔, 以此用來對衛(wèi)生趨勢做出分析, 并對清潔計劃予以優(yōu)化。

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【四、實驗結(jié)論與方案優(yōu)勢】

萊恩德LD - ATP系列菌落總數(shù)快速檢測方案, 經(jīng)過實際驗證，能夠穩(wěn)定地在15秒內(nèi)出具RLU定量結(jié)果, 其ATP回收率達到90 - 110%, 檢測干擾被控制在±5%或者±5 RLUs以內(nèi), 數(shù)據(jù)重復(fù)性良好, 符合GB 14934 - 2016《食品安全國家標準 消毒餐（飲）具》等標準對于表面潔凈度快速篩查的要求。此方案的核心優(yōu)勢體現(xiàn)為, 操作簡便, 即非專業(yè)人員經(jīng)由簡單培訓(xùn)后能夠在現(xiàn)場進行操作；效率很高, 單日處理樣本量能夠達到200份以上, 全部打破傳統(tǒng)培養(yǎng)法的24小時等待期限；數(shù)據(jù)可追溯, 借助在線監(jiān)管平臺, 歷史數(shù)據(jù)以圖表形式展現(xiàn), 助力用戶準確找出衛(wèi)生薄弱環(huán)節(jié)。對于中央廚房的衛(wèi)生管理人員來說, 這套方案可大幅提高清潔效果驗證效率, 降低因微生物超標引發(fā)的食品安全風(fēng)險, 還能減少送檢第三方實驗室的運維成本, 實現(xiàn)從需要在實驗室久等, 到現(xiàn)場馬上就能完成菌落總數(shù)檢測的轉(zhuǎn)變, 就更不用說針對學(xué)校食堂以及食品生產(chǎn)企業(yè)的衛(wèi)生管理人員了。

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【五、參考文獻/相關(guān)標準】

食品安全國家標準, 食品微生物學(xué)檢驗方面的內(nèi)容, 屬于菌落總數(shù)測定相關(guān)規(guī)定, 編號為GB 4789.2 - 2022。

《食品安全國家標準》中, 關(guān)于消毒餐（飲）具的編號為GB 14934 - 2016。

國標/T 18204點4杠2013, 《公共場所衛(wèi)生檢驗方法》, 第4部分, 公共用品用具微生物。

與2013年相關(guān)的《出口食品生產(chǎn)加工企業(yè)衛(wèi)生規(guī)范》, 其標準編號為SN/T 3600。

用于檢測食品表面潔凈度的ATP生物熒光法的技術(shù)規(guī)范, 這是行業(yè)通用的技術(shù)指南。

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